环氧乙烷标准样品配置过程简述

环氧乙烷（EO）是活跃的灭菌剂，灭菌能力强且适用性广泛，具有很强的穿透能力，近年来，环氧乙烷作为一种强有力的灭菌剂广泛用于医疗器械等一次性无菌产品的熏蒸灭菌。但环氧乙烷本身又是一种强刺激性物质，对皮肤黏膜具有强刺激性，同时具有致癌、致畸的毒性，会对人们的身体造成严重的伤害。因此合适的灭菌工艺、严格的残留量限制管控、以及保证灭菌后产品足够的熟化过程是确保一次性防护用品真正安全的关键因素。

环氧乙烷残留量检测常使用顶空-气相色谱法，采用外标法定量；由于环氧乙烷沸点低_{（10.7℃）}，室温下易挥发，因此标准样品配置过程需要特别加以注意，应当在低温环境下进行，否则会严重影响样品浓度的准确度和标准曲线的线性等。

1 工具与耗材

1.1 环氧乙烷标准品

市面上有各种溶剂配置的环氧乙烷标准品，可根据实际需要购买不同溶剂、不同浓度的环氧乙烷标准品：

本例采用水中环氧乙烷标准品，浓度5000μg/mL，如下图：

环氧乙烷标准品采购后，建议在冷冻环境中保存。

1.2 顶空分析相关工具和耗材

环氧乙烷残留量测定一般使用顶空-气相色谱法，因此除了顶空进样器、气相色谱仪之外，还需要准备顶空分析的相关耗材。

1.2.1 顶空进样器+气相色谱仪

1.2.2 顶空耗材和工具

主要包括：顶空瓶，顶空瓶盖（瓶盖+密封垫）和压盖钳，如下：

1.2.3 样品配置工具

主要包括：容量瓶若干_{（建议100mL）}、移液枪或者移液管_{（建议5mL+1000μL，或者其他）}，样品瓶_{（用以盛装环氧乙烷标准品）}、冰水浴、冷藏纯水_（4℃）等。

2 配置环氧乙烷浓度中间液

2.1 浓度配置计算

1）环氧乙烷标准品，浓度5000μg/mL；

2）精确移取0.2mL标准品溶液加入100mL容量瓶，加水至刻度，摇匀备用；获得浓度为5000*0.2/100=10μg/mL的中间溶液；_{（说明：最好逐级稀释）}

3）配制浓度为1μg/mL-10μg/mL的标准溶液：

①在顶空瓶中分别加入去离子水4.5ml、4ml、3ml、2ml、1ml、0ml；

②分别加入10μg/mL环氧乙烷中间溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，配成浓度为1ug/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL的标准浓度系列。

2.2 准备工作

1）环氧乙烷标准品转入样品瓶待用

环氧乙烷标准品安瓿瓶开瓶后，迅速转入样品小瓶中密封，并置于冰格盘中待用；或者环氧乙烷标准品安瓿瓶开瓶后，直接使用移液枪取用也可。

2）容量瓶中装入冷藏纯水待用

在100mL容量瓶中装入约90mL冷藏纯水，置于冰水浴中待用。

2.3 标准样品系列配置

2.3.1 配置环氧乙烷中间溶液

精确移取200μL标准品溶液_{（浓度5000μg/mL）}加入100mL容量瓶，加冷藏纯水至刻度，摇匀备用；获得浓度为5000*0.2/100=10μg/mL的中间溶液；_{（说明：最好逐级稀释，或者评估逐级稀释带来的样品损失和高倍数稀释带来的样品损失）}

说明：

①佩戴手套，注意防护；

②摇匀时，手指不要触摸容量瓶外壁，应在刻度线以上和瓶底正中；

③配置完成后，中间液应置于冰水浴中备用。

2.3.2 配置环氧乙烷标准浓度系列

在顶空瓶中分别加入冷藏纯水4.5ml、4ml、3ml、2ml、1ml、0ml；再分别加入10μg/mL环氧乙烷中间溶液0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，配成浓度为1ug/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL的标准浓度系列。

配置过程中，在顶空瓶中加入冷藏纯水后，应当及时置于冰水浴中，下图：

配置完成后，及时对顶空瓶进行密封，摇匀后备用。

3 样品测定

4 小结

环氧乙烷沸点低_{（10.7℃）}，室温下易挥发，因此标准样品配置过程需要特别加以注意，应当在低温环境下进行。